Prism 可以轻松地根据线性或非线性标准曲线进行插值。您只需在多个已知浓度下进行测定,拟合一条直线或曲线,即可对未知值进行插值。
但基于标准曲线进行插值存在一个问题。当未知样品受到其他物质污染并影响测定结果时,所得结果可能不准确。这被称为基质效应问题。
标准添加法是一种规避此问题的方案。向固定量的未知样本中添加不同浓度(包括零浓度)的已知物质,然后进行测定。这确保了所有样本中未知物质的含量相同,包括任何可能干扰测定的物质。
使用线性回归拟合数据。标准添加法仅在测定值(Y)与待测物质浓度成正比时才有效。
下图中的虚线显示了随着待测物质浓度的变化,测定结果(通常为吸光度)的变化情况。圆点和实线则显示了在存在未知浓度的待测物质时,测定结果的变化情况。这会将曲线向上并向左偏移。
您需要知道的数值是实线相对于虚线向左偏移了多少。有一个简单的方法可以求出:将曲线向下外推至 Y=0。Prism 报告的参数之一是 X 截距,该值将为负数。 取其绝对值,即为未知物质的浓度。X 截距的置信区间可直接作为未知浓度置信区间的参考,只需将两个置信限值乘以 -1 即可。

要在 Prism 中绘制数据,需将线性回归直线延伸至 X 截距处(可在“线性回归参数”对话框中选择此选项)。您可能还希望将原点移至左下角,此选项位于“设置坐标轴”对话框的第一个选项卡中。Prism 文件。