剂量反应曲线可用于绘制多种实验的结果。X轴表示药物或激素的浓度(或剂量),Y轴表示反应,该反应可以是几乎任何一种生物功能的测量指标。
“剂量”一词常被宽泛地使用。从最严格的意义上讲,该术语仅适用于对动物或人进行的实验,即向受试者施用不同剂量的药物。此时,您并不知道药物在作用部位的实际浓度 - 您只知道施用的总剂量。然而,“剂量反应曲线”这一术语也被更宽泛地用于描述体外实验,即在这些实验中施用已知浓度的药物。 “浓度-反应曲线”这一术语是此类实验结果的更精确表述。“剂量反应曲线”这一术语有时会被更宽泛地用于指代那些通过改变其他变量(如温度或电压)水平进行的实验。
剂量-反应实验通常使用约5-10个剂量的激动剂,这些剂量在对数刻度上等间隔分布。例如,剂量可能为1、3、10、30、100、300、1000、3000和10000 nM。 转换为对数(并稍作四舍五入)后,这些数值呈等间距分布:0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 和 4.0。
Prism中内置的所有剂量反应曲线均提供两种形式。一种形式假设X为浓度的对数或剂量的对数;另一种形式假设X为浓度或剂量。请确保选择与您正在分析的数据相匹配的方程形式。
EC50 或 IC50 值的不确定性通常具有明显的非对称性。因此,请务必选择能生成不对称区间的剖面似然法来计算置信区间。
在剂量反应曲线中,Y 值即为反应。例如,该反应可能是酶活性、细胞内第二信使的积累、膜电位、激素分泌、心率变化或肌肉收缩。
您可以通过乘以或除以常数将 Y 值转换为新单位。请使用 Prism 的“转换”分析功能进行此操作。转换为新单位不会从根本上改变曲线拟合的结果。
在某些情况下,从实验观测单位到实用单位的转换是非线性的。例如,将两个荧光值的比值转换为 Ca++ 浓度时,就需要进行非线性转换。拟合剂量反应曲线时应使用哪些 Y 值?非线性回归假设曲线周围的所有散点都服从高斯分布,因此应选用最能满足该假设的单位。在许多情况下,这可能难以确定。