当 X 值是浓度或剂量的对数时,应使用该方程。当 X 值是浓度或剂量时,请使用相应的方程。
许多剂量反应曲线都呈现出常见的S形曲线。这些曲线通常由四个参数定义:顶点、底点、Hill斜率以及EC50(或IC50)。顶点和底点参数描述了曲线达到平台期的数值——曲线会无限接近这些数值,但永远无法完全达到。 Hill斜率描述了这两个平台之间S形曲线的斜率。EC50(或IC50)指使测得的反应增加(或减少)至其最大值的一半(即50%)所需的激动剂(或拮抗剂)浓度。
然而,“一半”这一概念可以有多种解读方式。 您关注的是导致测得反应值位于曲线最大值(顶部)与最小值(底部)之间中点的浓度吗?还是您想要的浓度是导致测得反应值位于曲线最大值(顶部)与某个定义好的“基线”对照值之间中点的浓度?
在考虑抑制性数据时(即随着拮抗剂浓度的增加,测得的响应值会降低),这两个值分别被称为相对 IC50 和绝对IC50。
这是迄今为止最常见的定义,通常也是人们所说的响应“IC50”的含义。 它是将曲线压低至位于曲线“顶部”和“底部”平台中间位置所需的浓度。除非数据经过归一化处理,范围为 0 到 100,否则该值并不对应 Y 轴上的 50%。
能够诱发反应,且该反应值位于空白组(无拮抗剂,最大测得反应)与某阳性对照组(代表完全受抑制的反应)之间中点的浓度,有时被称为绝对IC50。在许多情况下,所使用的阳性对照可能是另一种已知能对所测反应产生最大抑制作用的标准药物。 通常,针对该标准阳性对照测得的反应值低于剂量反应曲线的“底部”。因此,绝对IC50和相对IC50将不相同。
在某些情况下,绝对IC50根本无法计算。例如,待测拮抗剂可能仅能将测得的反应降低至其最大(空白)值的60%,而无法进一步降低。 在这种情况下,绝对IC50将无法定义(无论拮抗剂浓度如何增加,均无法将测得的反应降低至最大反应的50%)。请务必明确您要报告的是哪种IC50,以及这些数值所代表的含义。
创建一个 XY 数据表。将激动剂浓度的对数输入到 X 列中。将反应值以任意方便的单位输入到 Y 列中。
从数据表中,单击“分析”,选择“非线性回归”,然后选择方程面板:“剂量反应方程——特殊”,其中 X 为 log(浓度)。接着选择“绝对IC50,X 为 log(浓度)”。
您必须在分析参数对话框的“约束”选项卡中为“基线”参数输入一个值。请注意该模型中“基线”与“底部”之间的关键区别。“底部”是指曲线本身底部平台区的 Y 值。 “基线”则是定义标准药物 0% 至最大抑制作用的 Y 值。虽然必须对基线进行约束,但您可能还需考虑对“顶点”参数进行约束。
Fifty=(Top+Baseline)/2
Y= 底部 + (顶部-底部)/(1+10^((LogAbsoluteIC50-X)*HillSlope + log((顶部-底部)/(Fifty-底部)-1)))

Top 和 Bottom 是 Y 轴单位下的平台值。
Hill斜率 描述曲线族陡峭的程度。Hill斜率的标准值为 1.0,建议将 Hill斜率约束为常数 1.0。Hill斜率大于 1.0 表示曲线更陡峭,小于 1.0 则表示曲线更平缓。
Baseline 是导致反应被最大程度抑制的“标准”药物或对照组的测得响应值。该值必须由用户在分析参数对话框的“约束”选项卡中输入。
LogAbsoluteIC50 是使响应值位于“顶值”(Top)与“基线”(Baseline)中间位置的拮抗剂浓度的对数值。这与位于“顶值”和“底值”(Bottom)中间位置的响应值不同(后者为相对 logIC50,且本分析未报告该值)。Prism 还会报告 AbsoluteIC50。