引言

可以通过测定未标记配体与放射性配体结合的竞争性结合情况，来确定该未标记配体的平衡解离常数。

分步操作

创建一个 XY 数据表。将未标记化合物的浓度对数输入到 X 列，将结合值输入到 Y 列。如果有多个实验条件，请将第一个条件放在 A 列，第二个放在 B 列，依此类推。使用子列输入重复实验数据。

在数据表中，单击“分析”，选择“非线性回归”，选择“竞争性结合方程”面板，然后选择“单结合位点——拟合 logEC50”。

模型

Y=底值 + (顶值-底值)/(1+10^(X-LogIC50))

 

参数解读

Top 和 Bottom 是 Y 轴上的平台值。

logIC50 是导致结合程度处于 Bottom 和 Top 中间位置的竞争物浓度的对数

注

该模型与抑制性剂量反应曲线相同。它拟合的是 logIC50，这与未标记配体的结合 Ki 值并不相同。Ki 值依赖于 IC50、放射性配体的浓度及其结合 Kd 值。您可以使用其他方程直接拟合 Ki 值。

该分析假设存在一个结合位点，且结合过程是可逆的并处于平衡状态。