引言

别构调节剂可降低放射性配体的结合。该模型适用于以下实验：在有无调节剂存在的情况下，分别测定完整的放射性配体结合曲线。其目标是确定调节剂与其结合位点的亲和力，并计算α值 - 这一三元复合物常数用于量化调节剂的结合对放射性配体与受体位点亲和力的改变程度。

分步操作

创建一个XY数据表。在X列中输入标记配体的浓度，可使用任意方便的单位（例如nM）。在Y列中输入特异性结合值，同样可使用任意方便的单位。 在 A 列中输入无调节剂的数据。在 B 列中输入在恒定调节剂浓度下收集的数据。如有数据，请重复此操作，分别在 C、D、E 等列中输入不同调节剂浓度的数据。在列标题中输入调节剂浓度（以纳摩尔为单位，即 1 nM 输入为“1”）。请勿忘记将数据集 A 的列标题设为“0”。

在数据表中，点击“分析”，选择“非线性回归”，选择“饱和结合方程”面板，并选择“别构调节剂位移”。

无需将任何参数约束为常数值。

模型

Hot=X

Alpha=10^logalpha

KB=10^logKB

KApp=KDHot*((1+Allo/KB)/(1+alpha*Allo/KB))

Y=Bmax*Hot/(Hot+KApp)

参数解读

Kb 是调节剂与其别构位点结合的平衡解离常数（摩尔）。其单位与在数据表列标题中输入调节剂浓度时使用的摩尔单位相同。

KdHot 是放射性配体的平衡解离常数。其单位与输入 X 值时使用的单位相同，本示例中为 nM。

α 是三元复合物常数。当 α=1.0 时，调节剂不会改变结合。若 α 小于 1.0，则调节剂会降低配体结合；若 α 大于 1.0，则调节剂会增强结合。在本示例中，α 等于 0.01，因此调节剂会显著降低结合。

注释

•该模型旨在分析未标记化合物通过别构位点发挥作用的数据。由于标记和未标记配体通过不同的位点发挥作用，因此将调节剂称为竞争者是不恰当（且不正确）的。

•该模型旨在拟合α的对数，而非α本身。这是因为α的分布是不对称的（0 到 1 之间的所有值均表示调节剂降低结合，而 1 到无穷大之间的所有值均表示调节剂增强结合）。 在对数尺度上，其数值分布更为对称，因此基于对数尺度计算的置信区间（如Prism所做）更为精确。Prism会同时报告α值和log(α)值。

•该模型假设别构调节剂处于过量状态，因此您添加的浓度非常接近其游离浓度。当别构调节剂浓度成为限制因素时（例如G蛋白改变许多受体的激动剂结合时），该模型将失效。目前尚无显式模型能处理这种情况。您需要使用隐式方程（等号两边均为Y）来定义模型，而Prism无法处理此类方程。

参考文献                                                                          

A. Christopoulos 和 T. Kenakin，《药理学评论》（Pharmacol Rev），54: 323-374, 2002