引言

别构调节剂可降低放射性配体的结合能力。该模型适用于以下实验：在有无调节剂存在的情况下，分别测定完整的放射性配体结合曲线。 本模型的目标是确定调节剂与其结合位点的亲和力，并确定α值——该三元复合物常数可量化调节剂的结合在多大程度上改变了放射性配体与受体位点的亲和力。

分步操作

创建一个 XY 数据表。在 X 列中输入标记配体的浓度，可使用任何方便的单位（例如 nM）。在 Y 列中输入特异性结合值，单位同样可自选。在 A 列中输入无调节剂条件下的数据。在 B 列中输入调节剂浓度恒定条件下收集的数据。如有相关数据，请重复此操作，分别在 C、 D、E、……，每列对应不同的调节剂浓度。在列标题中输入调节剂浓度（以纳摩尔为单位，即 1 nM 输入为“1”）。请勿忘记将数据集 A 的列标题设为“0”。

从数据表中，点击“分析”，选择“非线性回归”，选择“饱和结合方程”面板，然后选择“别构调节剂位移”。

无需将任何参数约束为常数值。

模型

Hot=X

Alpha=10^logalpha

KB=10^logKB

KApp=KDHot*((1+Allo/KB)/(1+alpha*Allo/KB))

Y=Bmax*Hot/(Hot+KApp)

解读参数

Kb 是调节剂与其别构位点结合的平衡解离常数（摩尔）。其单位与在数据表列标题中输入调节剂浓度时所用的摩尔单位相同。

KdHot 是放射性配体的平衡解离常数。其单位与输入 X 值时使用的单位相同，本示例中为 nM。

α 是三元复合物常数。当 α=1.0 时，调节剂不会改变结合。如果 α 小于 1.0，则调节剂会降低配体的结合。 若α大于1.0，则调节剂会增强结合。在本示例中，α等于0.01，因此该调节剂会显著降低结合。

注

•该模型旨在分析未标记化合物通过别构位点发挥作用的数据。由于标记和未标记配体作用于不同的位点，因此将调节剂称为“竞争者”是不恰当的（也是错误的）。

•该模型是针对α的对数而非α本身进行拟合的。这是因为α具有非对称性（0 到 1 之间的所有值均表示调节剂会降低结合，而 1 到无穷大之间的所有值均表示调节剂会增强结合）。 在对数刻度下，其数值更具对称性，因此基于对数刻度计算的置信区间（如 Prism 所做）更为准确。Prism 同时报告 α 和 log(α) 值。

•该模型假设别构调节剂过量存在，因此您添加的浓度非常接近其游离浓度。当别构调节剂浓度成为限制因素时（例如 G 蛋白改变激动剂与许多受体的结合时），该模型将无法适用。目前尚无任何显式模型能处理这种情况。 您需要使用隐式方程（等号两边均含Y）来定义模型，而Prism无法处理此类方程。

参考文献                                                                         

A. Christopoulos 和 T. Kenakin，《药理学评论》（Pharmacol Rev），54: 323-374, 2002