引言

竞争性抑制剂可与底物在同一位点上可逆地结合，因此通过使用极高底物浓度可以完全克服其抑制作用。Vmax 值保持不变，而有效 Km 值则增加。您可以通过在不同浓度的抑制剂存在下测定底物-速率曲线，来确定竞争性抑制剂的 Ki 值。

分步操作

创建一个 XY 数据表。在 X列中输入底物浓度，在 Y列中输入酶活性。每个数据集（Y列）代表在不同浓度抑制剂存在下收集的数据，从零开始。将这些浓度输入到列标题中。请确保输入的是浓度，而不是浓度的对数。

或者，选择“竞争性酶抑制”示例数据集。

输入数据后，点击“分析”，选择“非线性回归”，选择“酶动力学方程”面板，并选择“竞争性酶抑制”。

模型

KmObs=Km*(1+[I]/Ki)

Y=Vmax*X/(KmObs+X)

 

常数 I 是抑制剂的浓度，您需要将其值输入到每个列标题中。该值受限于等于数据集常数。

参数 Vmax、Km 和 Ki 是共享的，因此 Prism 会为整个数据集拟合一个控制数据。

参数解读

Ki 是抑制常数，其单位与您输入到列标题中的 I 相同。

Vmax 是无抑制剂条件下的最大酶速率，其单位与 Y 相同。

Km 是米氏常数，其单位与 X 相同。它描述了在无抑制剂存在时底物与酶的交互作用。

如果数据与模型拟合不佳，请考虑改用非竞争性或非竞争模型进行拟合。或者使用混合模型抑制的更通用方程进行拟合。

参考文献                                                                         

方程 3.1 出自：RA Copeland，《药物发现中的酶抑制剂评估》，Wiley 2005。ISBN:0471686964。RA Copeland，《药物发现中的酶抑制剂评估》，Wiley 2005。ISBN:0471686964。