引言

非竞争性抑制剂会与酶-底物复合物结合，但不会与游离酶结合。这会同时降低有效Vmax和有效Km。底物-速率曲线向下并向左平移。

可以通过在不同浓度的抑制剂存在下测定底物-速率曲线，来确定竞争性抑制剂的Ki值。

分步操作

创建一个 XY 数据表。在 X列中输入底物浓度，在 Y列中输入酶活性。每个数据集（Y列）代表在不同浓度抑制剂存在下收集的数据，从零开始。将这些浓度输入到列标题中。请确保输入的是浓度，而不是浓度的对数。

输入数据后，点击“分析”，选择“非线性回归”，选择“酶动力学方程”面板，并选择“非竞争性酶抑制”。

模型

VmaxApp=Vmax/(1+I/AlphaKi)

KmApp=Km/(1+I/AlphaKi)

Y=VmaxApp*X/(Kmapp+X)

 

常数 I 代表抑制剂浓度，该值需输入到各列标题中。此值受限于必须等于数据集中的某个常数。

参数 Vmax、Km 和 Ki 是共享的，因此 Prism 会为整个数据集拟合一个控制数据。

参数解读

Vmax 是无抑制剂条件下的最大酶速率，其单位与 Y 相同。

Km 是米氏常数（无抑制剂条件下），其单位与 X 相同。它描述了无抑制剂条件下底物与酶的交互作用。

AlphaKi 是抑制常数，其单位与您在列标题中输入的 I 相同。它是 Ki（由于非竞争性抑制剂不与酶结合，因此该值非常高）与 alpha（该值非常低）的乘积。无法分别拟合 alpha 和 Ki，只能确定它们的乘积。有些书籍将此乘积称为 Ki'。

如果数据与该模型拟合不佳，请考虑改用竞争性或非竞争性模型进行拟合。或者采用混合模型抑制的更通用方程进行拟合。

参考文献                                                                         

方程 3.6 出自：RA Copeland，《药物发现中的酶抑制剂评估》，Wiley 2005。ISBN:0471686964。RA Copeland，《药物发现中的酶抑制剂评估》，Wiley 2005。ISBN:0471686964。