什么是饱和结合？

在饱和结合实验中，通过改变放射性配体的浓度，并在达到平衡时测量结合情况。其目的是确定Kd值（在平衡状态下，能与受体位点结合一半的配体浓度）和Bmax值（最大结合位点数）。

总结合、非特异性结合和特异性结合

配体不仅会与受体位点结合，还会与非特异性位点结合。处理非特异性结合有三种方法。

•扣除非特异性结合，仅分析特异性结合。

•仅分析总结合，并根据总结合曲线的形状推断非特异性结合的量。

•对总结合和非特异性结合进行全局拟合。

我们推荐第三种方法（对总结合与非特异性结合进行全局拟合）。 拟合特异性结合的问题在于，为了从总结合中扣除非特异性结合，必须做出一些假设，而拟合得到的数值并不是真正的数据。在可能的情况下，我们建议您对实际收集的数据进行拟合，并避免创建衍生数据集（在本例中即特异性结合）。

仅拟合总结合曲线所需数据较少，因此可节省实验时间和资金。但大多数人认为，仅凭结合曲线的形状来定义非特异性结合（而未通过实验测量非特异性结合）会让人感到不适。 仅对总结合进行拟合的一个优势在于，已有推导出的方程可用于拟合此类数据，即使当相当一部分配体发生结合，导致配体耗尽（游离浓度远低于添加浓度）时也是如此。

单结合位点与双结合位点

Prism 提供了用于拟合单结合位点或双结合位点的模型。您可以通过“比较”（Compare）选项卡中的选项来比较这两种拟合结果。在比较单结合位点模型与双结合位点模型的拟合结果时，请结合常识和统计学分析进行判断。 如果其中一个结合位点仅占总结合量的极小部分，或者其Kd值超出了实验中使用的放射性配体浓度范围，则不应采用双位点模型。