什么是饱和结合？

在饱和结合实验中，通过改变放射性配体的浓度，并在达到平衡时测量结合情况。其目的是确定Kd值（即在平衡状态下结合到受体位点一半的配体浓度）和Bmax值（即最大结合位点数）。

总结合、非特异性结合与特异性结合

配体不仅会结合到受体位点，还会结合到非特异性位点。处理非特异性结合有三种方法。

•扣除非特异性结合，仅分析特异性结合。

•仅分析总结合，并根据总结合曲线的形状推断非特异性结合的量。

•对总结合和非特异性结合进行全局拟合。

我们推荐第三种方法（对总结合与非特异性结合进行全局拟合）。拟合特异性结合的问题在于，为了从总结合中扣除非特异性结合，必须做出某些假设，而由此拟合出的结果并非真实数据。在可能的情况下，我们建议直接拟合实际采集的数据，避免创建衍生数据集（本例中即特异性结合）。

仅拟合总结合曲线所需数据较少，因此可节省实验时间和经费。但大多数人认为，仅凭结合曲线的形状来定义非特异性结合（而未通过实验测定非特异性结合）会令人感到不适。仅拟合总结合曲线的一个优势在于，已有推导出的方程可用于拟合此类数据，即使当相当一部分配体结合导致配体耗尽（游离浓度远低于添加浓度）时亦然。

单结合位点与双结合位点

Prism 提供了单位点和双位点拟合模型。您可通过“比较”选项卡中的选项来对比两种拟合结果。在比较单位点与双位点模型的拟合结果时，请结合常识与统计分析。若其中一个位点仅占总量的极小部分，或其 Kd 值超出实验中放射性配体浓度的范围，则不应采纳双位点模型。